液相色譜儀分配系數(shù)與組分、流動(dòng)相和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)，也與溫度、壓力有關(guān)。在不同的色譜分離機(jī)制中，K有不同的概念：吸附色譜法為吸附系數(shù)，離子交換色譜法為選擇性系數(shù)(或稱交換系數(shù))，凝膠色譜法為滲透參數(shù)。但一般情況可用分配系數(shù)來表示。
高效液相色譜儀的記錄樣品通過檢測(cè)器吸光度變化引起的電信號(hào)變化，從而產(chǎn)生色譜圖，最終結(jié)果取決于后期色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的數(shù)據(jù)處理。以下是兩種常用的高效液相色譜儀數(shù)據(jù)處理方法。光譜處理后可以制作校正曲線。校正曲線是數(shù)據(jù)處理的重點(diǎn)。它是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，使信息和數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)光譜圖處理樣品光譜圖。高效液相色譜儀的校正是通過分析制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品來確定計(jì)算絕對(duì)組分濃度的響應(yīng)系數(shù)的過程。
1.外標(biāo)法：外標(biāo)法是在空白樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為對(duì)照樣品，與未知樣品同時(shí)進(jìn)行樣品處理和檢測(cè)，并計(jì)算出被檢測(cè)成分的濃度的定量方法。根據(jù)對(duì)照品響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)品濃度函數(shù)的關(guān)系，測(cè)定未知試樣中的成分。
2.內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加入一定量的被測(cè)樣品混合物中，對(duì)含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行高效液相色譜儀分析，測(cè)定峰面積和相對(duì)含量。分別測(cè)定內(nèi)標(biāo)物和受試物的有效校正系數(shù)，并按公式計(jì)算受試物的含量。
兩種適合的數(shù)據(jù)處理方法的差別為高效液相色譜儀：內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)方法是將標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為要求的內(nèi)部條件，并以合適的操作條件對(duì)樣品進(jìn)行嚴(yán)格的試驗(yàn)和試驗(yàn)結(jié)果的檢驗(yàn)，但對(duì)樣品的精確操作條件和試驗(yàn)結(jié)果的分析必須是嚴(yán)格的，而對(duì)樣品的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)則不需要對(duì)樣品進(jìn)行嚴(yán)格的校正。
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