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液相色譜儀的分離系統由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。一、色譜柱:液相色譜儀的色譜柱一般用內部拋光的不銹鋼制成,柱內徑為1~4mm,柱長為10~50cm,柱形多為直形,內部充滿微粒固定相。近年來,由于高性能填充劑的細粒化,3~5um微粒填料的使用,趨向柱內徑為...
制備型液相色譜儀的分離目的是從混合物中得到純物質。為了縮短分離時間和提高分離效率,制備型液相色譜的的進樣品量很大,導致色譜柱的分離負荷相應加大,因此必須加大色譜柱填料,增大柱內徑和柱長,使用的流動相相對增多。然而,當色譜柱上的樣品負載加大時,往往會導致柱效急劇下降而得不到純產品。制備型液相色譜要解決容量與柱效之間的矛盾,對重現性也要考慮。從經濟上來說,要少用填料,少用溶劑,盡可能多的得到產品。一、樣品的前處理:制備型液相色譜柱分離的樣品多,比分析型液相色譜柱更容易受污染,樣品...
液相色譜技術自發明以來,由于其高效、高靈敏度等特點,得到了飛速發展。近年來,伴隨著生物技術和精細化工的發展,作為液相色譜分支的制備液相色譜也日益受到重視,成為了生物技術產品和研究中*的手段。分析色譜與制備色譜的根本區別在于分離目的不同。分析色譜,反映的是樣品的組成,追求的是高效分離和高靈敏度,不需要收集特定的餾分,洗脫液通常作為廢液來處理。但在制備色譜中,為了節省投資和操作費用,必須以最少的時間生產最大量的產品。由于目的不同,制備色譜與分析色譜所選用的操作參數,包括色譜柱尺寸...
HPLC過程中影響待測組分遷移的因素較多,同一組分在不同色譜條件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作條件下,同一組分在不同色譜柱上的保留值也可能有很大差別。因此,在高效液相色譜分析過程中,對定性分析方法提出了更高的要求。(1)利用檢測器的選擇性進行定性將經色譜柱分離后的樣品引入并聯或串聯的幾種不同檢測器,根據它們不同的檢測性能,視其出峰情況可以初步判別出未知化合物的具體類別。(2)反相色譜中的“a、C”指數定性在以硅膠為固定相的反相色譜中,待測組分保留值與流動相組成關系式...
高效液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。使用高效液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛地應用于化學和生化分析中。高效液相色譜跑梯度如何平衡基...
液相色譜儀(LiquidChromatography)是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀的樣品預處理方法:1、過濾、離心:常用的濾膜材質有纖維素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺應用較廣。2、加速溶劑萃取:加速溶劑萃取是在提高溫度(50~200℃)和壓力(...
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